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發(fā)布時(shí)間： 2022-11-30 點(diǎn)擊次數(shù)： 1280次PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。各醫(yī)院都在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)工作，需要注意一些要求，博泰小編帶大家了解相關(guān)知識(shí)。
一、選址
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)相對(duì)獨(dú)立，盡量避免與其他普通實(shí)驗(yàn)套疊或者有通道上的交叉。我們看過(guò)一個(gè)圖，他們的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)置在檢驗(yàn)科的最里面，醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送要穿過(guò)檢驗(yàn)科的整個(gè)走廊，這種情況人流、物流、污物均在同一個(gè)通道，交叉感染風(fēng)險(xiǎn)較高，應(yīng)盡量避免。
二、設(shè)置區(qū)域
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。4個(gè)區(qū)域應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的緩沖間，應(yīng)設(shè)置可以通到四個(gè)操作區(qū)域的PCR走廊，在進(jìn)入各區(qū)域前，應(yīng)設(shè)置更衣間，每個(gè)區(qū)域的衣服可用不同顏色進(jìn)行區(qū)分，在清潔區(qū)應(yīng)設(shè)置洗澡間、衛(wèi)生間、值班室。還應(yīng)考慮到醫(yī)廢和標(biāo)本的運(yùn)送通道。
三、空氣流向
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉感染的可能性，通風(fēng)方式應(yīng)為機(jī)械通風(fēng)，不應(yīng)自然通風(fēng)，且不宜使用循環(huán)風(fēng)。同時(shí)要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)比例以保證各試驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
四、院感管理
1.進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)按照單一方向進(jìn)行，即試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
2.各區(qū)域的設(shè)備、清潔用具標(biāo)記明確，不得混用。各區(qū)域的衣服用不同顏色標(biāo)記，離開(kāi)各區(qū)域時(shí)不得將工作服帶出。盡量避免不必要的走動(dòng)和進(jìn)出，減少交叉感染風(fēng)險(xiǎn)。
3.試驗(yàn)臺(tái)用移動(dòng)式紫外線燈消毒，高度60-90cm。擴(kuò)增區(qū)延長(zhǎng)照射時(shí)間，最好是過(guò)夜照射。同時(shí)各區(qū)域還需安裝懸掛式紫外線燈管。
4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。
5.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：本區(qū)域?qū)毫](méi)有明確要求，儲(chǔ)存試劑和用于標(biāo)本制作的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域；試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū)，應(yīng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。
6.標(biāo)本制備區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)域應(yīng)為正壓，以避免臨近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
7.擴(kuò)增區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)應(yīng)為負(fù)壓，為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)域內(nèi)的走動(dòng)。必須注意的是，所有經(jīng)過(guò)檢測(cè)的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開(kāi)。
8.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：相對(duì)于臨近區(qū)域應(yīng)為負(fù)壓。本區(qū)域是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)源，因此必須注意避免通過(guò)本區(qū)域扥物品帶出。本區(qū)域需要配置高壓滅菌鍋用以滅活擴(kuò)增后的標(biāo)本。
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